Como parte de los estudios científicos realizados en el Laboratorio de Virología, dirigidos a resolver incógnitas derivadas de la pandemia actual, el equipo de Hemolife ha recibido muestras de pacientes diagnosticados por PCR para SARS-CoV-2, con el objetivo de realizar análisis para conocer las dinámicas de este agente etiológico.  

El Laboratorio de Virología de Hemolife estudia muestras de aspirado nasofaríngeo tomadas en medio de transporte viral y previamente caracaterizadas por PCR y secuenciación para definir su linaje. Dichas muestras biológicas han sido tomadas en diferentes latitudes del país, a personas con distintas condiciones clínicas: hospitalizadas, comunitarias o asintomáticas, y se conservaron hasta el momento del aislamiento en ultracongelación a -70°C. 

Una vez están en manos de nuestros profesionales, son llevadas a la Cabina de Seguridad Biológica del Laboratorio en donde inicia el proceso de aislamiento, que consiste en poner las muestras en interacción con células que son permisivas para el ingreso del virus, con el fin de que se multiplique y así lograr una mayor concentración de material biológico para los estudios. 

En la cabina, garantizando las condiciones de esterilidad, las muestras son descongeladas, luego se les adicionan 1mL de medio de cultivo Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM),  suplementado al 2% con suero fetal bovino, una solución que contiene los nutrientes necesarios para el crecimiento de las células en condiciones de laboratorio óptimas. Seguidamente, se pasan por filtros de 0,22 micras para eliminar la posible carga microbiana acompañante. 

Por otro lado, 16 horas antes se han sembrado las células Vero E6 hasta encontrarse preparadas para los estudios. A partir de ese momento se les retira totalmente el medio de cultivo y se ponen en interacción con cada muestra durante una hora, para luego adicionar el medio de cultivo fresco suplementado al 2% de suero. Esta interacción muestra/células continúa durante un periodo máximo de 7 días en botellas de cultivo incubadas a 37°C -5% de CO₂. 

Luego de pasado el término de incubación, si se encuentran hallazgos de efecto citopático, se recoge el stock viral y se expande nuevamente en células Vero E6 para generar uno nuevo, el cual debe ser cuantificado para determinar la concentración de virus presente. Si por el contrario, tras los 7 días de incubación no se evidencian signos de efecto citopático, se realiza un segundo pase que se incuba por el mismo periodo de tiempo en busca de signos de este efecto; de no hallarse este resultado, las botellas de cultivo se descartan y el aislamiento se categoriza como negativo.

Con estos pasos concluidos en el Laboratorio, se han logrado aislar los linajes A.1, B.1.5, B.1.111, B.1.111+E484, circulantes en el país. Este proceso amerita la rigurosidad científica que la Fundación Banco de Sangre Hemolife garantiza con protocolos estandarizados y llevados a cabo por su excelente equipo técnico y profesional, toda vez que si no se parte del sustrato adecuado se puede llegar a conclusiones erradas más adelante.

Contar con virus aislados para la investigación es importante, ya que son la materia prima requerida para desarrollar los estudios subsiguientes. De esta manera es posible evaluar, por ejemplo, la eficacia de la vacuna, la duración de la respuesta inmune tras la infección o el comportamiento a nivel biológico de los virus que circulan en el país. 

Miguel Germán Rueda Serbausek

CEO Fundación Banco Nacional De Sangre y Tejidos HEMOLIFE | Ciencia e Investigación Médica | Neurólogo C | MSc Medicina Regenerativa | Ex Ministro Salud (e) | Ex Vice Ministro de Salud | Ex Director del INVIMA